复方松及片提取物对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响

发布时间:2021-10-19 08:58:50

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 复方松及片提取物对博莱霉素诱导的小鼠肺 纤维化的影响 作者:危金松 李金优 梅汝焕 曾豆豆 李子刚 陈季强 汤慧芳 来源:《中国医药导报》2012 年第 28 期 [摘要] 目的 观察复方松及片(CFRB)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响,初步探究 复方松及片对肺纤维化的作用及其机制。 方法 采用气道滴入博莱霉素(2.5 mg/kg)制备肺纤 维化模型,在造模后每日采用灌胃方式给予复方松及片提取物,对照组腹腔注射地塞米松。连 续用药 14 d 后,采用生理盐水进行支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage fluid,BALF), 收集 BALF,ELISA 法测定转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的含 量。液氮速冻肺组织,-80℃保存,检测各组肺组织羟脯氨酸含量,以及 PDE8A mRNA 的表 达。 结果 复方松及片提取物对博莱霉*赖稳胗盏嫉姆蜗宋浠幸欢ǖ囊种谱饔茫 改善肺组织的纤维化病理改变。复方松及片提取物能明显降低 BALF 中 TGF-β 的含量,且对 磷酸二酯酶 8A(PDE8A)的 mRNA 表达也有一定的抑制作用。 结论 复方松及片对博莱霉素 诱导的肺纤维化有一定作用,提示复方松及片可能用于肺纤维化的治疗,同时 PDE8A 可能是 肺纤维化的新靶点。 [关键词] 复方松及片;肺纤维化;博莱霉素;磷酸二酯酶 8A [中图分类号] R332 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2012)10(a)-0024-04 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种原因不明、与年龄相关的破 坏性肺部疾病,以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱导致肺间质纤维化为特征,通常这种实质病变 具有不可逆性及严重的致死率[1]。目前尚无有效的治疗手段来阻止或逆转纤维化的过程,因 此寻找可以在上皮损伤过度修复过程中发挥作用的药物,成为探索终止和逆转肺纤维化过程的 关键。 复方松芨片(Compound Formula Rosin and Bletilla Table,CFRB)的主要成分是白及 (Bletillae Rhizoma)、沙参(Fourleaf Ladybell Root,Radix Adenophorae)、百部(Stemona Root,Radix Stemonae)等,这些成分均归肺经,具清肺、化痰、止咳、扶正抗痨、止血生肌 等功能,临床上主要用于各型结核病出血、慢性咳喘及慢性胃肠疾病等,临床效果显著。有文 献报道白及对矽肺肺部症状有改善作用[2],而沙参对博莱霉素诱导的肺纤维化有改善作用[35],但作用尚不清楚。本研究采用博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型,研究 CFRB 对肺纤维化 病理改变的影响,进一步检测代表性的炎症因子如 TGF-β1 的分泌,肺组织中羟脯氨酸的含量 等,并从 mRNA 表达水*进行了相关机制研究,为临床治疗肺纤维化提供新途径,为老药新 用提供实验依据。 1 材料与方法 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 1.1 实验动物、药品、试剂和仪器 ICR 小鼠,雄性,8 周,体重在 20~22 g,由浙江大学动物实验中心提供,动物合格证 号:2007000526749。动物饲养及操作过程均遵守浙江大学《实验动物管理条例》要求。 博莱霉素(Sigma 公司,批号:9041-93-4),复方松及片(京山中医院,批号: 20100501),地塞米松磷酸钠注射液(浙江省仙琚制药股份公司)。 Real time PCR 相关试剂[包括 dNTP Mixture,Oligo(dt)18 primer,RNase Inhibitor,MMLV Reverse Transcriptase,宝生物工程(大连)有限公司],羟脯氨酸测定试剂盒(凯基, KGT030-2),小鼠 TGF-β1 ELISA 试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司),小鼠 β-actin、 PDE8A 引物(由上海生工生物工程有限公司合成)。 PCR 仪(Eppendoff 公司),水*电泳仪(英国 CLP 公司)。 1.2 模型建立与实验分组 根据本实验室建立的小鼠肺纤维化造模方法,对小鼠进行 4%水合氯醛麻醉(280 mg/kg),然后有创气道给药法滴入生理盐水配制的博莱霉素(2.5 g/L),剂量为 2.5 mg/kg, 地塞米松组腹腔注射地塞米松 2.0 mg/kg,正常组滴入同等体积的生理盐水。 CFRB 提取液配制方法:将片剂粉碎研磨后称重,5 倍重量的蒸馏水浸泡过夜,5 000 g 离 心取上清,然后 70℃水浴浓缩至 1 g/mL 浓度,依次稀释成 0.20、0.04 g/mL。灌胃给药剂量分 别为低剂量 0.4 g/kg、中剂量 2.0 g/kg、高剂量 10.0 g/kg,博莱霉*赖稳牒蠹纯几 莱霉素给药后 14 d 处理,半侧肺进行支气管肺泡灌洗及留取另半侧肺组织进行病理学、蛋白 及分子生物学检测等。 1.3 肺组织病理学观察 小鼠股动脉放血处死后,留取肺组织用 10%福尔马林溶液固定,制备石蜡切片,作病理检 查,进行 Masson 染色,观察肺组织纤维化改变,Masson 染色组织切片上蓝染色的为胶原蛋 白。 1.4 肺组织中羟脯氨酸含量测定 取右肺称重,加入 1 mL 水解液匀浆后 100℃水浴(电磁炉保温档)水解 20 min,调 pH 值 至 6.0~6.8,然后加入蒸馏水 10 mL,混匀,3 500 r/min 离心 10 min,取 1 mL 上清,60℃水 浴 15 min,冷却后,550 nm 波长读取数值。计算公式: 羟脯氨酸含量(μg/mL) = (测定管吸光度-对照管吸光度)/(标准管吸光度-空白管吸光 度)× 标准管含量(μg/mL)×[水解总

相关文档

  • 葡萄籽提取物对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响
  • 白藜芦醇对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用
  • GHK对博莱霉素诱导的小鼠肺间质纤维化的作用及机制研究
  • AQP4基因敲除对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的影响
  • 博莱霉素诱导小鼠肺间质纤维化造模方式的选择
  • 不同剂量博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的差异及动态变化
  • 不同剂量博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的差异和动态变化
  • 猜你喜欢

  • 2020年暑假读书计划暑假如何读好书
  • 4.7世界卫生日活动方案
  • 广东顺德贰叁叁信息科技有限公司企业信用报告-天眼查
  • 2015年公司秘书辞职报告范文
  • (安徽专用)(新课标)2014届高三语文二轮专题复* 训练4 基础知识+实用类文本阅读
  • 杜甫名言名句大全_名人名言
  • 58、赶集、百姓网:分类信息三国杀 正走向何样的终局?
  • .Net操作Office总结一 - 使用VS2010自带的Office模板进行开发
  • 天津市鑫淼天越商务信息咨询有限公司(企业信用报告)- 天眼查
  • Spring MVC 国际化的三种实现方式
  • 关于诚实的句子摘抄
  • 我的中国梦演讲稿:我有一个梦想与我的中国梦演讲稿:我的工商梦汇编
  • 最具创意的婚宴答谢词
  • 最新一年级下册语文看拼音写汉字
  • 毕业设计电风扇智能控制系统设计
  • 小学六年级写人作文:记一位我最敬佩的人
  • 中国民族乐器与西洋乐器
  • 店开张祝贺词
  • 2003年清华大学运筹学考研试题
  • 办公室日常事务办理商务秘书
  • 《原神》怎么给武器强化?
  • 年度护士个人工作总结
  • 交通事故责任认定划分标准是如何规定的?
  • 中山市威尔金属结构有限公司(企业信用报告)- 天眼查
  • 安全生产自查报告范文通用4篇
  • 沈阳市沈北新区慧秀恋化妆品店企业信息报告-天眼查
  • 探究食品微生物检验的质量控制
  • 三原鸿翔水电服务社创业计划书
  • igbAAA2016年秋八年级数学上册 第15章 数据的收集与表示重热点突破 华东师大版
  • 高考地理复*区域产业活动第1节产业活动的区位条件和地域联系学案新人教版
  • 大专学生毕业自我鉴定800字2020年
  • 文明奏响牧歌草原最强音——呼伦贝尔市新巴尔虎右旗创建全国文明旗工作巡礼
  • 4-4倡导绿色消费
  • 年轻人在网络创业致富故事
  • 国内贸易:连锁零售企业基本情况:连锁零售企业统一配送商品购进额:分登记注册类型(2004年至2016年)
  • 【9A文】销售人员的具体工作事项
  • 初一作文日记《考场如战场》300字(共6页PPT)
  • 微信文章排版技巧总结
  • 2015年度上海聚丰热镀锌有限公司销售收入与资产数据报告
  • 陕西省西安重点高中2015-2016学年高二上学期期中考试地理试卷及答案
  • 锦州市兄弟房地产开发有限责任公司凌河分公司企业信用报告-天眼查
  • 加拿大省提名移民的费用
  • 电脑版